Владимир Цыркунов - Клещевые инфекции в Беларуси

Хронические формы КЭ могут проявляться гиперкинетическим синдромом. Одним из исходов клещевого энцефаломиелита может быть синдром паркинсонизма. Возможно развитие миастении. У переболевших иногда обнаруживаются выраженные вегетососудистые и эндокринные нарушения, которые являются ведущим признаком последствий заболевания. Возможны у переболевших психопатологические реакции, такие как лабильность настроения, подавленность, замкнутость, неадекватность поведения, немотивированные поступки, состояния кратковременного возбуждения, неуживчивость, жестокость, негативизм и истерические реакции.

Клиническое распознавание КЭ на первом этапе основывается на известных клинико–эпидемиологических данных. В большинстве наблюдений удается установить предшествующее пребывание человека в лесу, укус клещом или употребление им сырого контаминированного молока. Сразу оценивается вероятная продолжительность инкубационного периода, а клинические исследования могут выявить нейроинфекционный характер болезни. Предварительный диагноз должен быть подтвержден лабораторными методами (ИФА, ПЦР).

Даже однократное определение высокой концентрации вирусспецифических иммуноглобулинов класса IgM в методе ИФА следует считать достоверным свидетельством в пользу клинического диагноза КЭ. Ранние антитела IgM в сыворотке пациентов выявляются, начиная с первых дней после укуса клеща. Диагностическая ценность ИФА для выявления вирусспецифических антител класса IgM максимальна в первой десятидневке после инфицирования. Антитела класса IgG в максимальных титрах выявляются в течение 2–6 мес. после инфицирования. Следует иметь в виду возможность обнаружения специфических антител в низких титрах в течение длительного времени у вакцинированных. Поэтому для подтверждения диагноза часто рекомендуется применение высокочувствительного ПЦР–анализа для определения РНК ВКЭ. Определение вирусной РНК при КЭ в образцах сыворотки, ликвора, в зависимости от сроков выявления и корреляции с определенными соотношениями уровней специфических антител IgM и IgG, может служить для диагностики серонегативной формы КЭ, затяжной реконвалесценции, прогноза второй волны лихорадки КЭ и возможности хронизации процесса.

Внутри–, межочаговая и региональная генетическая гетерогенность ВКЭ приводит к широкому структурному разнообразию эпитопов каждого из антигенов вируса. В результате среди циркулирующих в природе штаммов вируса значительную часть составляют антигенно–дефектные варианты. Сущность явления антигенной дефектности заключается в отсутствии гемагглютинирующего и преципитирующего антигенов и слабой иммуногенности на фоне высокой инфекционной активности вируса. В этих условиях основу иммунологических методов анализа специфических вирусных антител составляют реакции связывания только вируснейтрализующих антител, продуцируемых у лиц, инфицированных антигенно–дефектными вирусами в низких титрах. В природных популяциях ВКЭ доля соответствующих дефектных штаммов может достигать 30–40%. Лица, инфицированные антигенно–дефектными штаммами, в клинике образуют группу т.н. серонегативных больных и больных с низкими стабильными титрами.

При иммунологических методах определения ВКЭ некоторая неопределенность в оценке результатов анализа также возникает из–за того, что препараты меченых антител могут связываться с вирусами различных серотипов ВКЭ с разной эффективностью. Также требуется проверка специфичности меченых антител относительно реакции связывания с другими флавивирусами группы клещевого энцефалита. По этим причинам в последнее время в производстве ИФА–диагностикумов для клинического анализа в качестве меченых антител к ВКЭ используются моноклональные антитела, связывающиеся с определенным эпитопом Е–антигена ВКЭ, общим для известных серотипов этого вируса.

Для диагностики КЭ используется метод молекулярной гибридизации нуклеиновых кислот с ПЦР – геномная РНК ВКЭ определяется с применением молекулярных зондов – меченых фрагментов нуклеиновой кислоты, комплементарных к определенным участкам генома ВКЭ. Преимущества анализа РНК ВКЭ перед методом биопробы и анализом антигенов вируса иммуноферментным методом или методом флюоресцирующих антител очевидны.

Метод молекулярной гибридизации – более высокочувствительный тест: вирусная РНК выявлена из 50,9% исследованных проб крови больных с острым течением КЭ. При исследовании тех же образцов крови методом биопробы на беспородных белых мышах инфекционный вирус выявлен в 23,4% случаев. Столь значительное расхождение в результатах анализов в сыворотке объясняется возможной маскировкой вируса за счет формирования иммунных комплексов. В процессе депротеинизации при выделении РНК из анализируемого образца нуклеопротеиновые комплексы диссоциируют, и освобождающаяся вирусная РНК увеличивает частоту положительных результатов гибридизационного анализа. Более частое выявление РНК ВКЭ в крови больных может быть обусловлено также значительно более активным, чем репликация инфекционных вирионов, синтезом вирусной РНК в инфицированной клетке.