В процессе мы обнаружили ряд интересных особенностей, к которым, как нам казалось, имело смысл вернуться, если не найдем ничего в результате исполнения первоначального плана. Перейдя ко второму этапу, мы поняли, с какого конца взяться за это дело.
Анализируя полоски клейкой ленты, приложенные к телу Рейчел, криминалисты ЭКС использовали метод ДНК-экспертизы под названием «Анализ сверхмалых количеств ДНК» [39] Low-copy dna – это усеченная форма от low copy DNA analysis (варианты названия: Low Copy Number, LCN DNA). Этот вопрос обсуждался на форуме молекулярных биологов. Отмечалось, что устоявшегося русского перевода нет, и был предложен вариант: «Метод анализа сверхмалых количеств ДНК».
(СКД). СКД – разновидность стандартной ДНК-экспертизы (КТП, метод коротких тандемных повторов) и заключается в репликации интересующих участков ДНК в имеющемся небольшом ее количестве, пока не будет получен достаточный для проведения анализа объем. При СКД проводится 34 цикла репликации ДНК – на восемь больше, чем в стандартном методе.
С ДНК нужно быть очень осторожным, чтобы получить ровно необходимое количество для анализа: если окажется, что ее недостаточно, никакого результата получить не удастся; а если слишком много, реакция окажется ингибированной [40] То есть реакция будет проходить со сниженной скоростью, медленнее.
. Думаю, в ходе первоначального расследования произошло следующее: ожидая обнаружить на теле Рейчел лишь очень небольшое количество мужской ДНК, криминалисты воспользовались самой чувствительной методикой. Это было вполне обоснованное ожидание с учетом того факта, что не было обнаружено никакой содержащей ДНК физиологической жидкости, которая могла бы принадлежать преступнику. Проблема была в том, что они даже не задумались о том, почему не нашли не только мужскую ДНК, что не было особенно удивительным, но и никаких следов ДНК Рейчел.
У нас же был другой подход. Мы всегда начинали со стандартного анализа (в 28 циклов), чтобы использовать получившийся в образцах уровень ДНК в качестве отправной точки. Только после этого мы переходили к СКД-анализу, если считали это необходимым. Кроме того, мы всегда подготавливали растворы наших ДНК-экстрактов, которые могли дать понять, не ингибирует ли что-то реакцию, включая чрезмерную концентрацию ДНК или, например, какую-то химическую примесь.
Исследовав экстракты со взятой у ЭКС клейкой ленты с помощью стандартного метода в 28 циклов, мы получили смешанный ДНК-профиль. Основной его составляющей, казалось, была ДНК самой Рейчел, в то время как некоторые небольшие фрагменты принадлежали мужчине. Затем мы изучили те же самые экстракты с помощью СКД-методики в 34 цикла – той же, что была применена криминалистами ЭКС, – и стало очевидно, что реакция была слишком усилена, что привело к чрезмерному количеству ДНК и отсутствию каких-либо результатов.
Заинтригованные крошечными образцами мужской ДНК, мы переключили внимание на изначально снятые с интимных участков (с влагалища и ануса) полоски клейкой ленты, создав собственные экстракты с них. Затем мы подвергли их такому же анализу. Мы всегда проводим контрольный анализ на ДНК и считаем результат подтвержденным только тогда, когда его удается получить с обоих образцов. Это еще одна мера предосторожности при проведении ДНК-экспертизы, позволяющая отличить настоящие результаты от артефактов, полученных в ходе процесса и/или из-за особенностей имеющихся образцов. Исследовав образец, взятый с ануса, мы получили полный профиль Рейчел, и, хотя там было что-то еще, этот результат не был подтвержден контрольным анализом. Что касается образцов с влагалища, то даже после 28 циклов мы получили большое количество ДНК Рейчел и немного мужской, которой, однако, оказалось недостаточно, чтобы установить, кому именно она принадлежала.
Нам никогда особо не нравилась СКД-методика. Она была дорогостоящей и пользовалась плохой репутацией. Так, в деле о теракте в Оме судья Вейр постановил, что она ненадежная, и результаты такого анализа можно интерпретировать по-разному. А в ходе расследования исчезновения Мэдлин Макканн из отеля в Португалии результаты такого исследования, недостаточно точного, чтобы на него можно было полагаться, показали наличие небольшого количества ДНК Мэдлин в багажнике машины ее родителей, взятой ими напрокат через несколько недель после ее исчезновения. Таким образом, мы решили, что у нас появился идеальный повод применить другой подход. По сути, мы занялись очисткой экстрактов и повышением их концентрации, чтобы максимально избавиться от всего чужеродного материала, такого как соли и примеси, которые могут ингибировать ДНК-реакцию, а также регулировкой настроек оборудования для оптимизации процесса. Благодаря этому нам не приходилось применять дополнительные циклы репликации, используемые в СКД-методе и связанные с дополнительными осложнениями. В итоге удалось получить результаты ничуть не хуже, если не лучше.
Читать дальше
Конец ознакомительного отрывка
Купить книгу