М. Сысоева - Высокодисперсные коллоидные системы и меланины чаги

У мышей с трансплантированной Саркомой 180 индекс Т лимфоцитов снизился вдвое, а лимфоцитов селезёнки на 2/3 от нормального уровня. Применение СЭ в дозе 60 мг/кг привел к незначительному увеличению индекса Т лимфоцитов от 1,26 до 1,81 мг/г и существенному повышению индекса лимфоцитов селезенки с 4,13 до 11,22 мг/г (в сравнении с мышами с трансплантированной Саркомой 180, которые не принимали СЭ). Оральное применение СЕ в дозе 60 мг/кг предохраняет лимфоидный орган у мышей с Саркомой 180 не только за счёт возрастания количества лимфоцитов селезёнки, но и за счёт стимуляции пролиферации лимфоцитов. Поскольку применение СЭ в дозе 100 мг/кг в сравнении с предыдущей дозой слегка снижает накопление лимфоцитов, их пролиферацию и антираковый эффект, авторами высказано предположение о том, что снижение иммуномодулирующего эффекта с повышением концентрации СЭ обусловлено присутствием в СЭ полисахаридов, которые обычно запускают инактивацию иммунной системы организма хозяина [127]. С другой стороны, Мизуно описал 21 разновидность полисахаридов, присутствующих в природной чаге, отличающихся по структуре [128]. Из них ксилогалактоглюкан обладает выраженной иммуномодулирующей и противораковой активностью[129].

Как упоминалось ранее, рост или регрессия рака в организме хозяина в большей степени зависит от экспрессии bax и bcl-2 генов. Многие противораковые средства уничтожают раковые клетки, запуская их апоптоз как in vitro, так и in vivo через митохондрии или через «рецептор смерти» [130,131]. Запуск апоптоза в ответ на химиотерапию заключается в индукции или активации различных медиаторов, включая экспрессию или функционирование генов семейства bcl-2 [132]. Массовое производство про-апоптозных протеинов за счёт сверх высокой экспрессии гена bax приводит к регрессии рака. В противоположность этому массовая экспрессия гена bcl-2 приводит к созданию условий для роста раковых клеток [133]. У мышей с привитой Саркомой 180 не наблюдалась экспрессия антиапоптозного гена bcl-2, в то время как отмечена экспрессия проапоптозного гена bax в нормально развивающейся Саркоме 180. Масса опухоли достигла 2,19 г через 14 дней после трансплантации. Лечение мышей, имеющих Саркому 180, с помощью СЭ в дозе 20 мг/кг существенно ингибировало экспрессию гена bcl-2 и стимулировало экспрессию гена bax. Это отразилось в уменьшении веса опухоли на 27,71 %. При применении СЭ в дозе 60 мг/кг экспрессия гена bax увеличилась максимально и вес опухоли снизился на 76,86 %. При увеличении дозы СЭ до 100 мг/кг стимуляция экспрессии гена bcl -2 и снижение роста опухоли стали менее эффективны.

Ранее было установлено, что в клетках с апоптозом синтез ДНК блокируется в фазе G0-G1 [133]. Соответственно, интервенция синтеза ДНК раковых клеток становится одной из терапевтических целей противораковых лекарств. Основная терапия рака обычно применяет ДНК – повреждающие агенты, такие, как ионизирующая радиация и химиотерапевтические средства в дополнение к хирургическому вмешательству. Однако применение этих агентов также приводит к сильнейшему подавлению лимфоцитов организма хозяина в то же время, когда запускается апоптоз в раковых клетках [134]. Побочные эффекты химиотерапии очень сильно лимитируют лечебные дозы и прогнозы на выздоровление. Бурсцук с соавторами [135] показали, что водный экстракт чаги блокировал митоз клеток HeLa с возрастанием числа клеток в фазе G0-G1 in vitro. При нормальном росте клеток Саркомы 180 более 60 % клеток были в фазах G2-M, 35 % в S и только 2,02 % в G0-G1 фазе. В соответствии с их статусом активного роста только 2,06 % клеток имели стадию апоптоза. Динамика количества клеток Саркомы 180, находящихся в G0-G1 фазе, в зависимости от применённой концентрации СЭ составило: 20 мг/мл – 32,54 %, 60 мг/мл – 86,79 %, 100 мг/мл – 34,11 %. Апоптоз клеток Саркомы 180 существенно возрастал при применении СЭ и составил 22,28 %, 34,67 % и 43,36 % соответственно указанным концентрациям СЭ по сравнению с апоптозом, наблюдаемым в нормально развивающихся клетках Саркомы 180, – 2,36 %. С другой стороны, СЭ также показал защитный эффект от окислительного повреждения ДНК в лимфоцитах человека [27]. Эти результаты отчётливо демонстрируют, что СЭ селективно запускает апоптоз раковых клеток.

TNF является одним из факторов, выделяемый активированными макрофагами [136]. Адекватная доза TNF может воздействовать на рецептор, запускающий апоптоз [137]. В норме TNF-α ответ макрофагов у здоровых мышей находится на уровне ca.10 pg/ml в фильтратах культуры и достигает до 22,35 pg/ml и 68,73 pg/ml при применении СЭ в дозе 20 и 60 мг/мл соответственно. Повышение концентрации СЭ до 100 мг/мл приводит к снижению TNF-α в фильтрате культуры до 55,69 pg/ml. В сравнении – этот показатель у мышей с Саркомой 180 в фильтрате культуры составлял 4,27 pg/ml. Таким образом, одним из механизмов для запуска апоптоза раковых клеток с помощью СЭ, вероятно, является активация макрофагов и, возможно, других лимфоцитов, что приводит к увеличению выделения TNF. Следовательно, препарат из чаги (СЭ) осуществляет эффективную защиту лимфоцитов от индуцированного раковой опухолью их апоптоза и имеет значительный потенциал для индуцирования апоптоза в раковых клетках. Его применение приводит к активации клеток иммунной системы и усилению ими защиты организма в отношении онкогенеза.