Асклепий Хворый - Как бороться с врачами. В помощь практикующему больному

Существуют два направления серологических исследований. Первое — обнаружение с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого. В этом случае неизвестными являются антитела, содержащиеся в сыворотке. Поэтому в реакции используют заведомо известные антигены: живые или убитые микробы, их отдельные фракции — при диагностике бактериальных инфекций; тканевые жидкости, культуры тканей содержащие вирусы и т. п. — при диагностике вирусных заболеваний. Положительный результат свидетельствует о наличии соответствующих антител, отрицательный — об их отсутствии. Второе направление — установление родовой, видовой и типовой (классификационной) принадлежности микроба или вируса. В этом случае неизвестным компонентом реакции является антиген. Поэтому реакцию ставят с иммунными сыворотками, содержащими антитела к заведомо известному антигену в высокой концентрации.

Серологическое исследование, применяемое для обнаружения специфических антител, — обычно более доступный метод диагностики, чем выделение возбудителя из сред организма. В некоторых случаях обнаружение антител — единственный способ удостовериться в том, что в организме присутствует или присутствовал возбудитель инфекции. Рассмотрим некоторые распространенные серологические реакции.

1. Реакция агглютинации (РА).

Широко применяется в разных вариантах (непрямая или пассивная, коагглютинация, гемагглютинация и др.). Классическая РА бактерий заключается в склеивании и выпадении в осадок бактерий под действием антител. По характеру осадка определяют выраженность реакции. Реакция непрямой гемагглютинации (РИГА) имеет довольно высокую чувствительность и часто применяется для диагностики инфекций, вызванных бактериями и риккетсиями.

2. Реакция связывания комплемента (РСК).

Это сложный, но и точный метод. Широко применяется для обнаружения бактерий и вирусов. Механизм состоит в том, что антиген, соединившись с соответствующим ему антителом, прочно удерживает комплемент. Свидетельством наличия реакции служит целостность эритроцитов, которые добавляются к сыворотке. При отсутствии реакции комплемент остается свободным и разрушает эритроциты. Разведение исследуемой сыворотки производится (обычно вдвое) до тех пор, пока не освободится комплемент. Поэтому показатель концентрации антител, называемый титром, являет собою отношение 1:2N, где N — число разведений. Т. е. выглядит как 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 и т. д. Теоретически, конечно, пропорция разведения может быть любой. В некоторых случаях для достижения высокой точности применяются меньшие градации разведения. Чем меньше дробь — тем выше концентрация антител.

3. Реакция нейтрализации (РН).

Основана на способности специфических иммунных сывороток подавлять инфекционное действие вирусов. Реакция применяется для определения типов вирусов и титров антител. Существуют две модификации реакции: в первой возрастающее разведение взвеси, содержащей вирус, соединяют в равном объеме с постоянной дозой сыворотки, а во второй — возрастающее разведение сыворотки соединяют с постоянной дозой вируса.

Другие серологические методы в какой-то мере схожи с уже рассмотренными. Это: реакция преципитации, реакция задержки гемадсорбции, иммуноферментный анализ, радиоиммунологический анализ.

Самый точный и совершенный на сегодня, но вместе с тем и самый дорогой и малораспространенный в СНГ серологический метод — полимерная цепная реакция (ПЦР). Но такая высокая точность, какую он дает, обычно не нужна.

Существуют микробиологические методы непосредственного выявления возбудителей болезней в материале, взятом из организма. Материал берется до лечения противомикробными препаратами.

Микроскопический (бактериоскопический) метод заключается в исследовании с помощью микроскопа выделений человека или материала (соскобов, биоптатов).

Довольно точные и ранние результаты дает метод флюоресцирующих антител (МФА). Он основан на том, что люминисцентные красители, соединяясь с антителами и иммунными комплексами, придают им способность светиться в ультрафиолетовом свете.

Редко применяется электронная микроскопия препаратов из тканевых экстрактов и ультратонких срезов инфицированных клеток.

Наиболее распространенный в микробиологической практике культурный (или бактериологический) метод состоит в выделении из исследуемого материала чистой культуры микроба-возбудителя с целью дальнейшего изучения. Для этого подбираются питательные среды, оптимальные для исследуемого микроорганизма. Выращенные колонии возбудителей испытываются на чувствительность к антибиотикам.